Epstein-Barr病毒潜伏膜蛋白在肺癌中的表达

中华结核和呼吸感染 1999年第7期第22卷 论著摘要

作者：刘亚丽　戚好文　李焕章　张振山

单位：010031 呼和浩特，武警内蒙古总队医院内一科

　　目前，在各致癌因素中，病毒的致癌作用已成为一项重要的研究课题。Epstein-Barr病毒(EBV)是一种在人群中感染率很高的DNA致瘤病毒。许多研究已表明EBV感染与鼻咽癌等恶性肿瘤的发生关系密切。对于EBV感染与肺癌发生之间的关系仍无定论。我们用EBV潜伏膜蛋白单克隆抗体对100例肺癌患者进行免疫组化研究，观察潜伏膜蛋白-1(latent membrane protein-1,LMP-1)在肺癌中的表达情况，旨在探讨EBV感染与肺癌发生的关系。

　　材料与方法　标本取自西安西京医院病理科。其中男性81例，女性19例。年龄28～71岁，平均56岁。标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，5μm连续切片贴于经氨丙基三乙氧基硅烷处理的载玻片。采用免疫组化链霉卵白素-生物素-过氧化酶法(SABC法)染色。正常对照为12份正常支气管粘膜上皮。并设阳性对照和空白对照。结果评定：对切片观察5个高倍视野取其平均值，每一视野阳性细胞数＞5%确定为阳性，5%～24%为弱阳性(+)，25%～50%为中等阳性(++)，＞50%为强阳性(+++)。统计学处理：率的比较用卡方检验。不同分化程度肿瘤间LMP-1表达强度的比较用秩和检验。P＜0.05为统计学差异有显著性。

　　结果　LMP-1定位与分布：LMP-1阳性物质呈棕黄色颗粒。在癌组织中阳性细胞呈灶状，不均匀分布，主要定位于癌细胞胞浆中和胞膜上(见图1～3)。LMP-1的表达情况见表1，2。

图1　LMP-1在鳞癌中阳性表达　SABC法×400

图2　LMP-1在腺癌中阳性表达　SABC法×400

图3　LMP-1在小细胞癌中阳性表达　SABC法×400

表1　各组织类型间LMP-1阳性率比较

　　注：各组织类型间LMP-1表达差异无显著性，P＞0.05

表2　LMP-1在非小细胞肺癌中阳性表达与分化程度的关系

注：不同分化程度间LMP-1表达阳性率差异有显著性，P＜0.01；不同分化程度间

　　lMP-1表达强度差异有显著性，P＜0.05

　　讨论　EBV在人群中有很高的感染率，感染后以潜伏状态存在于细胞中，这种潜伏感染在致癌因素作用下被激活，导致肿瘤的发生^［1］。LMP-1已被许多研究证实是EBV编码的一种致癌蛋白，可通过以下途径使细胞癌变：影响小分子三磷酸鸟苷结合蛋白活性，使信号传导发生异常。它能与人类蛋白质LMP-1相关蛋白-1结合。这种结合能使其与肿瘤坏死因子受体结合减少，从而阻碍了通过该受体介导的细胞死亡，使EBV感染细胞逃避了宿主的防御功能。它可通过诱导bcl-2表达而参与细胞凋亡的调节^［2］。有学者发现反义LMP-1基因可降低癌细胞的生长速度^［3］。

　　基于上述原因，我们在100例不同组织类型、不同分化程度的肺癌中观察LMP-1的表达情况，阳性率33%，与西方国家的研究结果不同。西方国家在肺癌组织中EBV检出率很低，造成这种差异的主要原因可能与EBV在我国感染较普遍而且EBV的感染有种族差异有关。此外，LMP-1表达与组织类型无关的现象和一些学者提出的肺肿瘤细胞起源于呼吸道粘膜的干细胞，在某一阶段可向多方面分化的学说相符合。而阳性表达强度及表达率与肿瘤的分化呈负相关说明低分化细胞中EBV拷贝数高，这与病毒易于在代谢旺盛的细胞中寄生繁殖的特性相一致。我们的实验结果提示：EBV感染与一部分肺癌的发生可能有关。但其明确的致癌途径仍需进一步深入研究。

　　参考文献

　　1　Kasai K, Sato Y, Kameya T, et al. Incidence of latent infection of Epstein-Barr virus in lung cancer-an analysis of EBER1 expression in lung cancer by in situ hybridization. J Pathol,1994, 17:257-265.

　　2　Henderson S, Rowe M, Gregory C, et al. Induction of bcl-2 expression by epstein-Barr virus latent membrane protein 1 protects infected B cells from programmed cell death. Cell, 1991, 65:1107-1115.

　　3　李宝民，刘振生，纪志武，等.Epstein-Barr病毒反义LPM-1基因对鼻咽癌细胞CNE2株生长的抑制.病毒学报，1996，12：330-334.

(收稿：1998-08-28　　修回：1998-12-16)